分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收的特性，以較純的單色光作為入射光，測定物質(zhì)對光的吸收，從而對物質(zhì)進行定性或定量分析的儀器。

　　

　　在使用過程中常常會出現(xiàn)測量誤差，這些誤差又是如何產(chǎn)生的呢？

　　

　　一、復(fù)色光對比耳定律的偏離

　　

　　比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器的光度計，也只能獲得近乎單色的光，無法獲得純單色光，它仍然含有狹窄光通帶，具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會導(dǎo)致比耳定律的正或負偏離。

　　

　　光譜帶寬應(yīng)該是越小越好，但是隨著光譜分辨率的提高，儀器的靈敏度降低，所以選擇儀器時要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時，可近似認為符合比耳定律。

　　

　　二、雜散光的影響

　　

　　雜散光是指進人檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的其他波長組分，它是光譜測量中誤差的主要來源。

　　

　　產(chǎn)生原因有：分光光度計的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在光度計工作波段邊緣波長處，由于單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度都較低，雜散光的影響更明顯。

　　

　　三、儀器噪聲對測t的影響

　　

　　儀器噪聲也是儀器的一個重要指標，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100%T和0%T線，可觀察到分光光度計的絕對噪聲水平。

　　

　　如果儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。